革兰氏染色液的原理及注意事项

革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法。

 

革兰氏染色法的染色原理

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。

革兰氏染色液使用注意事项

1、要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色
2、涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性
3、火焰固定不宜过热（以玻片不烫手为宜）
4、乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节：脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌；脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。因而脱色时间一般为20-30s。

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